5月17日，园博会正式开园前一天，地铁14号线作为通往园博会的唯一地铁线路，也为正式开园做好了各项准备。
其中，地铁园博园站距离园博园的入口门1号门约300米，主要承担平日乘客的进出站服务。作为地铁路网中通往园博园的唯一枢纽站，14号线西局站与10号线实现换乘。
14号线西段于5月5日开通试运营，根据对开通约两周的运营情况分析，14号线园博园站客流以旅游休闲为主，节假日及高峰日客流量大，平日客流相对较小。上午以出站客流为主，高峰时间段为8点至9点；下午以进站客流为主，高峰时间段为16点至17点，客流日均分布不均衡。园博园站在遇大客流时,北侧A、B口只出不进，南侧C出口只进不出。
同时，京港地铁还在公司内部提前招募志愿者，并已对志愿者进行站内及站外情况的前期培训，志愿者将从园博会开园当日起，在开园前两日、端午节、中秋节以及国庆节期间为乘客提供如客流疏导、路程指引等各方面服务。
为更好地服务园博会，京港地铁14号线自5月15日起，缩小高峰期最小行车间隔至5分钟，小时单向运能提升60%。其中，工作日每天计划开行362列次，早高峰（7时-9时）和晚高峰（17时-19时）最小发车间隔由之前的8分钟间隔缩至5分钟，平峰时段发车间隔由8分钟缩至6分钟。双休日将首次采用双休运行图，全日计划开行车次为372列次，早高峰（8时-11时）和晚高峰（16时-19时）最小行车间隔为5分钟，平峰时段行车间隔为6分钟。
另外，为更好地保障乘客出行安全，京港地铁还在14号线园博园站原有4台安检设备的基础上，特别增设3台安检设备，以确保在大客流时，能提高乘客安检速度，期间将遵循“逢包必检，逢液必查，逢疑必问”的原则，加强乘客安检力度，也请广大乘客予以配合。